Bộ xét nghiệm nhanh an toàn thực phẩm, cung cấp vận chuyển dễ dàng và không cần chuỗi lạnh để phát hiện Shigella bằng PCR thời gian thực

LyoDt® chất phản ứng phát hiện PCR thời gian thực cho Shigella

1.Mô tả

Chigellalà một vi khuẩn Gram âm và là một mầm bệnh phổ biến gây bệnh ruột ở người. Nó xếp hạng là nguyên nhân chính gây bệnh tiêu chảy truyền nhiễm ở Trung Quốc.Lây truyền chủ yếu xảy ra thông qua việc ăn thức ăn bị nhiễm trùng (đường phân-miệng), với các triệu chứng phổ biến nhất bao gồm tiêu chảy (bàn nước), sốt và buồn nôn.

Sản phẩm này là một chất phản ứng PCR thời gian thực đông khô để phát hiệnChigella.Nó sử dụng gen ipaH được bảo quản cao củaChigellaLà một hỗn hợp chính chứa tất cả các thành phần cần thiết, ngoại trừ mẫu DNA, và nó được phân phối trước như một xét nghiệm duy nhất trong ống PCR để dễ sử dụng.Sản phẩm này không cần dây chuyền lạnh để vận chuyển và lưu trữ, làm giảm đáng kể chi phí vận chuyển và loại bỏ sự mất mát có thể do lãng phí phản ứng và ô nhiễm khí phun.

2. Thông số kỹ thuật và thành phần

3. Lưu trữ Và thời hạn sử dụng

Lưu trữ ở nhiệt độ môi trường (5-30°C). Nó ổn định trong 12 tháng. Sau khi mở bao bì chân không, vui lòng lưu trữ các sản phẩm không sử dụng trong túi nhựa có thể niêm phong lại với chất khô,và trong túi giấy nhôm.

Cảnh báo:

Các viên thuốc thử nhỏ hơn là một dấu hiệu của độ ẩm thấm vào ống và thuốc thử ẩm.Bất kỳ chất phản ứng nào có kích thước viên hạt nhỏ hơn đáng kể so với bình thường nên được loại bỏ hoặc thử nghiệm với kiểm soát dương tính trước khi sử dụngđể kiểm tra mẫu.

4. Cần thiết bị và chất phản ứng bổ sung

1) Công cụ PCR thời gian thực

2) Pipette và đầu

3) Nước không chứa nuclease

4) Bộ dụng cụ chiết xuất axit nucleic

5. Hệ thống PCR thời gian thực tương thích

ABI 7500/Fast, Roche LightCycler 480II, BioRad CFX96, Bioer LineGene 9600.

6. Các mẫu chấp nhận được

Nước dùng làm giàu thực phẩm, nôn mửa, mẫu tiêu chảy, vv.

7. HOÀN HOÀN

1) Chất chiết xuất axit nucleic

Tái lấy DNA từ các mẫu bằng dụng cụ thu thập thích hợp.Nó được khuyến cáo rằngDNA được xua tan với khoảng 100μlcủa bộ đệm elution(TEhoặcH không chứa nuclease₂O)trong bước cuối cùng củachiết xuất.Axit nucleic tinh khiết nên được sử dụng ngay lập tức hoặc lưu trữ ở nhiệt độ -20 °C.

2) Chuẩn bị kiểm soát tích cực

Các kiểm soát tích cực có thể được lưu trữ ở nhiệt độ xung quanh trước khi tái hydrat hóa trong tối đa 12 tháng. Nó nên được tái hydrat trước khi sử dụng bằng cách thêm 250 μl bộ đệm TE hoặc H không nuclease₂O, xoáy ở tốc độ thấp trong 15-20 giây và ly tâm ở tốc độ thấp trong 15-20 giây.

3) Chuẩn bị hỗn hợp PCR thời gian thực

A) Mở gói chân không và lấy các dải 8 ống chứa chất phản ứng. Kiểm tra viên đạn ở dưới cùng của ống (Cắt số ống cần thiết nếu cần thiết).Nếu các ống cung cấp không tương thích với thiết bị của bạn, chuyển viên thuốc thử vào một ống quang tương thích với thiết bị của bạn.

B) Mở ống và loại bỏ nắp (không phù hợp với máy PCR thời gian thực) và chuẩn bị hỗn hợp phản ứng trên băng như dưới đây.

* Nước không chứa nuclease có thể được sử dụng làm kiểm soát âm.

C) Bấm PCR bằng cách sử dụng nắp (dải) phù hợp với PCR thời gian thực ((không được cung cấp).

D) Động các ống với tốc độ thấp trong 10 ~ 15 giây, và ly tâm ở 3000rpm trong 20 giây và đặt chúng vào một dụng cụ PCR thời gian thực.

2) Thiết lập RT-PCR

Đặt khối lượng phản ứng là 25μl, và quy trình khuếch đại PCR như sau. Thu thập quang huỳnh FAM ở 60 °C, và chọn NONE làm tham chiếu thụ động.

3) Phân tích và giải thích kết quả