Bộ thử nghiệm nuôi trồng thủy sản VHSV Thử nghiệm PCR nhiễm trùng huyết do virus Thử nghiệm PCR

Bộ xét nghiệm PCR vi rút xuất huyết do vi rút (VHSV) (Phương pháp đầu dò huỳnh quang)

 
Mục đích sử dụng:

Bộ dụng cụ này thích hợp cho việc chẩn đoán phụ nhiễm Vi-rút tụ huyết trùng (VHSV) ở cá bột hoặc các mẫu mô phủ tạng như tim, ruột, lá lách và thận của cá.

Nguyên tắc:
 
Bộ kit này sử dụng RNA làm khuôn và mồi làm điểm khởi đầu để tổng hợp các sợi cDNA bổ sung cho khuôn RNA dưới tác dụng của enzyme phiên mã ngược hiệu quả cao.Chọn gen virus gây bệnh tụ huyết trùng, thiết kế bảo tồn gen của virus, thiết kế đầu dò đặc hiệu, đầu dò có vùng khuếch đại mồi ở giữa khuôn mẫu DNA liên kết cụ thể, trong quá trình mở rộng PCR, các enzyme Taq polymerase được mô phỏng vòng từ đầu 5 'của nhóm huỳnh quang trên đầu dò sẽ được cắt nhỏ, làm cho nó tự do trong hệ thống phản ứng, do đó dập tắt các nhóm ra khỏi đầu 3 ', huỳnh quang được phát ra và phát hiện bằng thiết bị PCR huỳnh quang để nhận ra axit nucleic phát hiện vi rút bệnh tụ huyết trùng trong hệ thống phản ứng hoàn toàn khép kín.
 
Các thành phần chính:
 

1. Loại mẫu

Cá con hoặc các mẫu mô phủ tạng như tim, ruột, lá lách, thận, v.v.

2. Thu thập và vận chuyển mẫu

Mẫu phải được thu thập và vận chuyển phù hợp với SC / T 7103. Mẫu phải được vận chuyển đến phòng thí nghiệm càng sớm càng tốt trong điều kiện làm lạnh để tránh đông lạnh-tan băng lặp lại.

3. Bảo quản và vận chuyển

Các mẫu được vận chuyển trong túi đá 2 ℃ ~ 8 ℃, và việc đông lạnh và rã đông lặp lại bị cấm.Lưu trữ ngắn hạn ở -20 ℃, -70 ℃ có thể được lưu trữ lâu dài.

Khuếch đại PCR và phát hiện huỳnh quang (vùng phát hiện PCR):

Đặt từng ống phản ứng vào thiết bị PCR và thực hiện khuếch đại PCR theo các quy trình sau:

FAM được chọn cho các kênh phát hiện.

Kiểm soát chất lượng:

1. Kiểm soát âm: Không có đường cong khuếch đại rõ ràng của kênh phát hiện FAM;
2. Điều khiển tích cực: Kênh FAM cho thấy đường cong khuếch đại rõ ràng, giá trị Ct ≤30;
3. Các điều kiện trên được đáp ứng đồng thời trong cùng một thí nghiệm;nếu không, thử nghiệm không hợp lệ và yêu cầu thử nghiệm lại.

Lưu ý: Kết quả được đánh giá là vùng xám, cần được kiểm tra lại.Nếu kết quả kiểm tra lại là giá trị Ct <45 được coi là dương tính và không có giá trị Ct nào hoặc giá trị Ct ≥45 được coi là âm tính.

Chỉ số hiệu suất sản phẩm:

1. Độ chính xác

Các tài liệu tham khảo tích cực của các doanh nghiệp thử nghiệm đều cho kết quả dương tính.

2. Giới hạn phát hiện tối thiểu: giới hạn phát hiện của bộ dụng cụ này là 10copies / μL.

3. Độ chính xác: Hệ số biến thiên (CV,%) của giá trị Ct độ chính xác trong lô là ≤5%.

4. Hệ số tương quan tuyến tính, tuyến tính |r |> 0,980.

  Chi tiết hoạt động vui lòng kiểm tra từ IFU!