Virus đầu vàng YHV Bộ xét nghiệm nuôi trồng thủy sản Pcr Test RT PCR

Bộ công cụ phát hiện axit nucleic của vi rút đầu vàng (YHV) (RT-PCR-Phương pháp đầu dò huỳnh quang)

 
Mục đích sử dụng:

Bộ kit này thích hợp để phát hiện cụ thể vi rút gây bệnh đầu vàng (YHV) trong các mẫu mô như mang, tuyến râu, mô tạo máu và cơ quan bạch huyết của tôm sú.

Nguyên tắc:
 
Bộ kit này sử dụng RNA làm khuôn và mồi làm điểm khởi đầu để tổng hợp các sợi cDNA bổ sung cho khuôn RNA dưới tác dụng của enzyme phiên mã ngược hiệu quả cao.Chọn đầu dò thiết kế bảo tồn gen virus mèo cốc, đầu dò có thể có vùng khuếch đại mồi ở giữa khuôn mẫu DNA liên kết cụ thể, trong quá trình mở rộng PCR, các enzyme Taq polymerase được mô phỏng vòng từ đầu 5 'của nhóm huỳnh quang trên đầu dò sẽ bị cắt nhỏ, làm cho nó tự do trong hệ thống phản ứng, do đó dập tắt các nhóm ra khỏi đầu 3 ', phát sáng. Axit nucleic của vi rút đầu vàng tôm (YHV) được phát hiện bằng PCR huỳnh quang trong một hệ thống phản ứng hoàn toàn khép kín.
 
Các thành phần chính:
 

1. Loại mẫu

Mẫu mô từ tôm sú

2. Bộ sưu tập mẫu

Các mẫu được thu thập theo SNT 1151.4-2003.

Lấy mô tôm tươi làm mẫu.

2.1 Đối với ấu trùng hoặc tôm non, tôm nguyên con hoặc đầu tôm được lấy làm mẫu.Để loại bỏ đầu, sử dụng kéo và nhíp đã khử trùng để loại bỏ mắt, miếng dán ngực, tất cả các phần phụ của lồng ngực và vùng bụng phía sau đầu.

2.2 Đối với tôm trưởng thành, các sợi mang, cơ quan bạch huyết hoặc huyết sắc tố được lấy làm mẫu.

3. Bảo quản mẫu

Nó có thể được lưu trữ trong 24 giờ ở 2 ℃ ~ 8 ℃, và có thể được lưu trữ trong thời gian dài ở -20 ℃.

Khuếch đại PCR và phát hiện huỳnh quang (vùng phát hiện PCR):

Đặt từng ống phản ứng vào thiết bị PCR và thực hiện khuếch đại PCR theo các quy trình sau:

FAM được chọn cho các kênh phát hiện.

Hình ảnh chỉ số hiệu suất sản phẩm:

Kiểm soát chất lượng:

1. Kiểm soát âm: Không có đường cong khuếch đại rõ ràng của kênh phát hiện FAM;
2. Điều khiển tích cực: Kênh FAM cho thấy đường cong khuếch đại rõ ràng, giá trị Ct ≤30;
3. Các điều kiện trên được đáp ứng đồng thời trong cùng một thí nghiệm;nếu không, thử nghiệm không hợp lệ và yêu cầu thử nghiệm lại.

Kết quả giải thích

Lưu ý: Kết quả được đánh giá là vùng xám, cần được kiểm tra lại.Nếu kết quả kiểm tra lại là giá trị Ct <45 được coi là dương tính và không có giá trị Ct nào hoặc giá trị Ct ≥45 được coi là âm tính.

Chỉ số hiệu suất sản phẩm:

1. Độ chính xác

Các tài liệu tham khảo tích cực của các doanh nghiệp thử nghiệm đều cho kết quả dương tính.

2. Giới hạn phát hiện tối thiểu: giới hạn phát hiện của bộ dụng cụ này là 10copies / μL.

3. Độ chính xác: Hệ số biến thiên (CV,%) của giá trị Ct độ chính xác trong lô là ≤5%.

4. Hệ số tương quan tuyến tính, tuyến tính |r |> 0,980.

  Chi tiết hoạt động vui lòng kiểm tra từ IFU!